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博客使用 CoraLite 结合物探索细胞角蛋白动力学使用 CoraLite 结合物探索细胞角蛋白动力学

想要了解有关细胞角蛋白及其在疾病发展中的作用的更多信息？推出针对细胞角蛋白的 CoraLite 缀合抗体。

细胞角蛋白

细胞角蛋白是形成中间丝的角蛋白，支持细胞抵抗机械应力。由细胞角蛋白形成的细胞骨架由上皮细胞组成，上皮细胞排列在器官的最外层表面。这些特定的角蛋白结构形成头发、指甲和皮肤组织，以及器官和腺体的保护层。人类表达 20 种不同类型的器官和组织特异性细胞角蛋白，其异常存在可以作为一系列癌症的标志。

细胞角蛋白类型

< p>细胞角蛋白分为两类：1 型-酸性细胞角蛋白和2 型-碱性细胞角蛋白。细胞角蛋白标有数字，表明ir 分子量（如表 1 所示）。形成细胞骨架等结构的角蛋白丝是分子大小相似的碱性和酸性细胞角蛋白单元的组装体，形成非共价键合的杂聚物。不同细胞因子的表达因器官、组织和发育阶段而异，从而可以及早识别上皮的特定类型。因此，细胞角蛋白表达的研究可以将癌症与其他类型的癌症区分开来。因此，细胞角蛋白分析广泛应用于肿瘤表征和诊断。

细胞角蛋白与疾病

多种细胞因子被发现在各种癌症中异常表达，并且因此，细胞角蛋白是一种用于癌症诊断的肿瘤标记物 (1, 2)。表1显示了与各种癌症相关的细胞角蛋白亚型。

表1.人类癌症中细胞角蛋白的表达（1）

癌症部位

相关细胞角蛋白

选定的蚂蚁ibodies

Pt抗体

皮肤

CK-1, -4-6, -10, -13-19

细胞角蛋白5

28506-488

肺

CK-7、-8、-18、-19

细胞角蛋白18

10830-488

乳房

CK-5、-6-8、-14、-17-19

细胞角蛋白19

14965-488

胃

CK-7、-8、-18-20

细胞角蛋白7

15539- 488

肝脏

CK-8、-18、-19

细胞角蛋白19

14965-555

胆囊

CK-7、-8、-18-20

细胞角蛋白20

60183-488

胰腺

CK-7、-8、-18-20

细胞角蛋白 17

17516-488

肾脏

CK -7、-8、-18、-19

细胞角蛋白19

60187-488

结肠

CK-7，- 8、-18-20

细胞角蛋白20

60183-594

子宫

CK-5、-7、-8、 -18，-19

细胞角蛋白5

28506-555

卵巢

CK-7，-8，-18，- 19

细胞角蛋白7

15539-555

子宫颈

CK-4-8、-10、-13-19

子宫颈

CK-4-8、-10、-13-19

细胞角蛋白13

10164-488

前列腺

CK-8、-18、-19

细胞角蛋白18

10830-594

细胞角蛋白 7 (CK-7)

CK-7 的阳性特征经常在原发性卵巢肿瘤、宫颈内膜肿瘤和上消化道肿瘤 (3) 以及大多数恶性肿瘤中观察到间皮瘤呈 CK-7 阳性 (4)。 CK-7是确定转移癌原发部位的常用标志物。 CK-7 还在肺癌、乳腺癌、甲状腺、卵巢、唾液腺和尿路上皮区域的癌症中表达 (12)。

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使用 CoraLite®488（左）和 CoraLite®555（右）结合的 CK-7 多克隆抗体进行免疫荧光 (IF) 染色

细胞角蛋白 17 (CK-17)

乳腺癌诊断不良与 CK-17 和/或细胞角蛋白 5/6 (5) 的表达有关，因此 CK-17 被认为是乳腺癌标志物。最近在胰腺癌中发现了 CK-17 高表达 (6)。尽管 CK-17 具有潜在的肿瘤抑制作用，但它的存在与肿瘤病理分级和预后相关 (6)。当 CK-17 丰度抑制胰腺癌细胞的迁移和侵袭时，CK-17 的肿瘤抑制作用就会显现出来。

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用 CoraLi 进行 IF 染色te®488（左）和 CoraLite®555（右）缀合 CK-17 多克隆抗体

细胞角蛋白 18 ( CK-18)

先前已报道食管鳞状细胞癌、肾细胞癌、口腔癌和肺癌中 CK-18 的表达增加 (2)。然而，CK-18 表达减少可能表明乳腺癌、结肠癌和鼻咽部存在恶性肿瘤。磷酸化、乙酰化和 O-GlcN-芳基化等翻译后修饰的改变会影响 CK-18 丝的稳定性、溶解度和组织。因此，这些修饰改变了细胞功能和细胞角蛋白在癌变中的作用 (7)。

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IF 染色与 CoraLite®488（左）和 CoraLite®594（右）结合的 CK-18 多克隆抗体

细胞角蛋白 20 (CK-20)

CK-20 的表达是侵袭性结肠和直肠腺癌的标志物，与肿瘤侵袭性和较差的患者生存率呈正相关 (8)。CK-20 也用作 Merkel 细胞的特异性标志物癌，有助于将其与其他恶性肿瘤和良性肿瘤区分开来 (9)。CK-20 过表达伴随 CK-7 表明存在胰腺癌 (10)。

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使用 CoraLite®488 进行 IF 染色（左) 和 CoraLite®594（右）缀合 CK-20 单克隆抗体

细胞角蛋白检测

细胞角蛋白检测(CK) 或细胞角蛋白片段 (CYFRA) 对于癌症诊断和肿瘤进展检测至关重要。 CYFRA 是细胞角蛋白的可溶性片段，可通过固相夹心免疫放射测定和/或电化学发光免疫测定进行测量 (11)。可以使用酶联免疫吸附测定 (ELISA) 试剂盒从患者的血清或血浆中检测选定的细胞角蛋白的水平。然而，为了研究器官/组织内的肿瘤进展，需要使用免疫荧光 (IF) 和免疫组织化学 (IHC) 等视觉技术来评估组织加入的程度。细胞角蛋白特异性抗体用于检测 i 的细胞角蛋白直接或间接对培养细胞或活检组织感兴趣。在直接检测中，单个一抗与可检测标签缀合，产生某种形式的检测信号。在间接检测中，二抗与识别靶标的一抗偶联，使检测过程更具特异性和选择性。

IHC 用于诊断癌症并确定肿瘤差异和进展。该技术需要使用酶联或荧光染料偶联的抗体。抗体与感兴趣的靶标结合后，酶或染料被激活，随后的光发射在明场显微镜下被捕获。然而，如果对细胞骨架和细胞角蛋白排列的详细结构数据感兴趣，IF 是一种更合适的诊断技术。

IF 染色中使用的抗体与荧光染料相连，可以在使用荧光显微镜的情况下可视化不同的激发波长。 CoraLite（488、594 和 647）是该技术中使用的一些荧光染料。 CoraLite 偶联抗体具有与 Alexa Fluor 相同的亮度，同时提供持久的荧光。 CoraLite 偶联抗体可同时用于多重共标记研究，因为所得荧光光谱的重叠极小。此外，这些还可以直接用于细胞/组织，无需调用二抗。

Proteintech 提供各种具有不同荧光光谱的 CoraLite 偶联抗体，可进行多重共标记并与其他 CoraLite 染料同时应用和/或其他流行的染料，例如核染色剂和 DAPI。

参考文献

Karantza V. 健康和癌症中的角蛋白：不仅仅是上皮细胞标记物。癌基因。 2011;30(2):127-38.翁玉荣,崔玉,方金玉.细胞角蛋白 18 在癌症中的生物学功能。分子癌症研究。 2012;10(4):485-93.Vang R 等人。卵巢原发性和继发性粘液性肿瘤中的细胞角蛋白 7 和 20：179 例的协调免疫组织化学表达谱和染色分布分析。美国外科病理学杂志。 2006;30(9):1130-9.褚PG，吴鄂，Weiss LM。上皮肿瘤中细胞角蛋白 7 和细胞角蛋白 20 的表达：435 例病例的调查。现代病理学。 2000;13(9):962-72.van de Rijn M 等人。细胞角蛋白 17 和 5 的表达可识别一组临床结果较差的乳腺癌。美国病理学杂志。 2002;161(6):1991-6.曾Y等。角蛋白 17 抑制胰腺癌中的细胞增殖和上皮间质转化。医学前沿。 2020;7.Sjostrom J、Alfthan H、Joensuu H、Stenman UH、Lundin J、Blomqvist C。血清肿瘤标志物 CA 15-3、TPA、TPS、hCG beta 和 TATI 在监测转移性乳腺癌化疗反应中的作用。斯堪的纳维亚临床与实验室研究杂志。今井野, 2001;61(6):431-41.等人。细胞角蛋白 20 的表达表明低分化结直肠腺癌的侵袭性组织学表型。抗癌研究。 2014；34(1A)：159-67。斯科特 MP，Helm KF。细胞角蛋白 20：诊断默克尔细胞癌的标志物。美国皮肤病理学杂志。 1999;21(1):16-20.Matros E 等人。细胞角蛋白 20 表达可识别总生存率降低的胰腺腺癌亚型。癌症。 2006;106(3):693-702.Morita T, Kikuchi T, Hashimoto S, Kobayashi Y, Tokue A. 膀胱癌中的细胞角蛋白-19 片段 (CYFRA 21-1)。欧洲泌尿外科。 1997；32(2)：237-44.Maniar KP，Umphress B。染色剂和 CD 标记，细胞角蛋白 7（CK7，K7）。病理学大纲（2020）。 https://www.pathologyoutlines.com/topic/stainsck7.html